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一.仪器介绍
啮齿动物步态分析系统(VisuGait,上海欣软)是用于定量评估由疼痛或其它运动缺陷引起的啮齿动物步态变化的完整系统和有利工具。该系统通过视频跟踪分析步态,对每个足印的时空参数,足印强度和动态肢体协调进行了完整的分析。该系统主要包括由一块1米长的玻璃板组成的高架封闭跑道,该玻璃板由来自侧面的荧光灯照射,并在玻璃内部反射。当啮齿动物经过该跑道并且它们的爪子接触玻璃板时,由于折射率的变化,光线离开玻璃板并向下反射。玻璃板下方的高速摄像头捕获图像(通常以 100 -150 fps 的速度记录),随后由连接的计算机程序进行分析。不同系统之间的主要区别在于相机的定位,例如在Treadscan上,位于跑步机下方的45°镜子允许单个摄像头捕捉动物的横向视图和腹背视图。实验时最好将设备放置于一个黑暗而安静的房间(< 20勒克斯的照明)。
二.实验步骤
1、跑道大小、颜色、照明等的差异可能造成实验室之间结果的差异性,这提醒我们,小的方法因素可以在啮齿动物步态分析中发挥重要作用,测试前应根据实验的模型查阅文献,尽量选择与文献一致的设置,以增加结果的重现性。另外,应在实验前一天调试好设备,并不再随意改动参数,由于该系统采用光线反射,最好在采光相同的时间段测试,测试时关闭测试室的房灯。
2、适应期:大鼠和小鼠均可用于步态分析。常用各种具有步态变化的疾病模型鼠,如帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型鼠。首先,让动物适应饲养室至少一周。在开始实验之前抚摩实验鼠至少5天。接下来,让动物进入测试室和步态系统适应,以减少应激,房间灯保持关闭。
3、测试前预训练:在第一次测试之前,动物进行大约3天的训练。将实验鼠放入设备的跑道起始端,将饲养笼放在步态跑道末端,作为目标盒,让实验鼠从实验者的手上沿着跑道走到它的笼子里,动物进入相对安全的饲养笼是其通过跑道的动机。